大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)泡素（FSH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)，再與 HRP標(biāo)記的大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗。用純化的大鼠促卵滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在  450nm 波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準曲線計算樣品中大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)濃度。
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因   NaN3抑制辣根過（HRP）活性。
大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣 50ml，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40ml，然后再加待測樣品 10ml（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有析出，稀釋時可在浴中加溫助溶，洗滌時不影響
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標(biāo)準曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本  OD值大于標(biāo)準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準。
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒本試劑不同批號組分不得混用。