真菌的培養方法

時間：2011/4/26閱讀：2577

玻片培養又稱小培養，小培養法可以隨時觀察真菌的生長形態（如大分生孢子、小分生孢子及孢子柄等），還可以隨時觀察其生長發育的全部情況，有利于菌種的鑒定。
1、鋼環法
（1）材料：白假絲酵母菌、沙保弱培養基、無菌玻片、蓋玻片、鋼環（帶有缺口）、石蠟。
（2）方法
①用無菌鑷子取無菌小培養鋼環，環的兩面分別蘸取熔化的固體石蠟，平置于無菌載玻片上，另取一無菌蓋玻片，在酒精燈火焰上加熱后覆蓋于鋼環上，待冷后，小培養鋼圈即被固定于載玻片與蓋玻片之間。
②用毛細滴管吸取融化的培養基，從鋼環上端孔注入，注入量占容積的1/2即可。
③培養基冷卻凝固后，用接種針挑取材料，由上端孔接種于環內培養基上。
④置濕盒內，室溫或37℃下培養2—3d后，逐日觀察，鏡下可連續看到真菌生長過程及菌絲、孢子等特征，一般7d左右即可長好。
⑤也可不用小培養鋼環，直接將融化的培養基滴于無菌玻片上，待冷凝后從周邊接種材料，用蓋玻片覆蓋后培養，在顯微鏡下連續觀察生長情況。
（3）結果：鏡下觀察可見到有胞壁增厚的厚膜孢子及假菌絲。

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