1.促生長兇子體外培養細胞除需要上述營養成分外,同樣需要促進細胞生長的激素類物質,尤其是促細胞生長因子。如胰島素能促使細胞利用葡萄糖和氨基酸,有促進有絲分裂作用,對很多細胞的增殖生長均有促進作用。*對皮膚上皮細胞及乳腺上皮細胞增殖生長有很好的促進作用,還能提高神經膠質細胞和成纖維細胞的克隆形成率。血清中宙有多種促細胞生長的因子,是體外培養細胞所需生長因子的重要來源。
血清中含有A、B、C、D四種因子。A因子能促進細胞早期生長,縮短潛伏期,清除細胞內脂肪滴。A因子比較小,呈酸性,可很快地通過火棉膠膜。B因子是…種脂肪形成劑。易使細胞產生脂肪滴,其本身是可溶性脂類,但不能通過火棉膠膜。B閡子在老年血清中含量較多,過濾可除去該因子。c因子可使細胞發生退化。D園子可促使細胞粘連,是一種黏著因子。若使B、C因子除去,則可促進細胞生長。血清中的球蛋白及肽對細胞有刺激性生長的作用,自蛋白不僅具有解除某些毒性物質(如油酸和重金屬離子)對細胞的毒性作用.而且能支持細胞的生長和增殖。
血清對體外培養細胞固然重要,但有不少因素可影響血清的作用,如供血者的年齡、血型、血色素、*、脂肪酸等。年齡較老動物的血清對細胞生長有抑制作用.其抑制成分存在于血清的類脂質與蛋白質部分,并能耐熱至65℃。隨著年齡的增加,血清*含量下降,而類脂質、蛋白質與抑制劑的濃度增加(B因子也隨之增加),對細胞生長不利;一般認為AB型血清比A型和O型血清對細胞生長有利,原因不清;低濃度的血色素可引起正常與惡性的鼠成纖維細胞的增殖,而高濃度血色素可產生抑制作用,因此在制備血清時,必須盡量避免溶血;低濃度*一般對細胞生長影響不大,對有的細胞有抑制作用,在選血清時,也應注意這個問題;血清中脂肪酸的含量對細胞生長有很大的影響,老年動物血清中脂肪酸的含量較高,雌性動物血清中脂肪酸的含量較雄性高,因此制備血清時應選擇雄性幼年動物。
血清在培養液中的濃度并非越高越好。原則上是能達到維持細胞良好的生長和繁殖,又不浪費。一般常用的比例是10%、20%和40%,隨各類細胞的需求而定。有時為了某種研究目的的需要,用無血清或低濃度(5%)血清培養。
由于生物工程技術方法的開發和進步,現已從血清、各種組織和其他生物成分中制取出多種促細胞生長物。