乙肝核心抗原(HBcAg)ELISA試劑盒操作說明
在長期的銷售實踐中,ELISA試劑盒實驗形成了*的市場優勢:產品齊全、價格合理、經營穩健、信息反饋及時、并能隨時隨地享受國外供應商zui直接、zui周到、zui完善的售后服務。
ELISA試劑盒操作步驟:
1.平衡:將試劑盒各組分從盒中取出,平衡至室溫(18℃-25℃),微孔板開封后,余者即時以自封袋封存。
2.配液:濃縮洗滌液配制前充分搖勻(如有晶體應充分溶解),濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1:19稀釋后使用。
3.編號:將微孔條固定于支架,按序編號。
4.稀釋:將待測血清樣品1:1000稀釋。
5.加樣:按順序分別在相應孔加入100μl已稀釋的待測血清樣品或陰、陽性對照血清。
6.溫育.置37℃溫育20分鐘。
7.洗滌:用洗滌液充分洗滌5次,洗滌完后扣干(每次均應保持30-60秒的浸泡時間)。
8.加抗原、酶:每孔中加入抗原(HBcAg)、酶標記抗體各50μl;輕拍混勻。
9.溫育:置37℃溫育40分鐘。
10.洗滌:用洗滌液充分洗滌5次,洗滌完后扣干(每次均應保持30-60秒的浸泡時間)。
11.顯色:每孔加底物A、B各50μl,輕拍混勻,室溫暗置15分鐘。
12.終止:每孔加終止液50μl,混勻。
13.測定:用酶標儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(用單波長測定時需設空白對照一孔,30分鐘內完成測定,并記錄結果)。
ELISA試劑盒注意事項:
1.血清的稀釋請使用10mmol/LPBS或生理鹽水。不宜用蒸餾水稀釋。
2.每板建議設陰、陽性對照血清各兩孔,設空白對照時,不加樣品、抗原及酶標記抗體,其余各步相同。
3.洗滌時各孔均須加滿,防止孔口內有游離酶未能洗凈。
4.加試劑前應將試劑瓶翻轉數次,使液體混勻。如果滴加,滴加前應棄去1-2滴。滴加時瓶身應保持垂直,以使滴量準確。注意勿將試劑滴在孔壁上。
5.所有樣品都應按傳染源處理。
6.封口膜使用說明。
(1)微孔板拆封后,在取出當天所需的微孔條后,其余微孔條可以封口膜封存以避免受潮。在封存時,注意勿把封口膜粘貼到微孔條底部,以免影響其透光性。
(2)微孔板溫育時,以封口膜覆蓋孔口,可避免其它因素對實驗帶來的非預期的影響。
7.不同品名、不同批號的試劑不可混用,以免產生錯誤結果。
8.使用EDTA、*、*作為抗凝劑不影響實驗結果。