大提柱式植物RNAout
產品及特點 本產品是天澤基因柱式植物RNAOUT（CAT#:71203）的大提升級產品，它結合了植物RNAOUT的性（其效果在近五十多種各類植物中得到驗證，植物名單見植物RNAOUT產品介紹的附錄）和天澤基因柱式純化系列產品的快捷性。該產品特點如下：
1. 樣品處理量大，一次可以處理5g的植物材料。
2. 操作簡單快速，處理一個樣品只需要約二十分鐘。
3. RNA純度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數植物中的多糖污染。
4. 產量高（具體根據材料不同而不同）。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實驗。
規格及成分 成 份 5次包裝
溶液A 100 mL
溶液B 30 mL
溶液C 100 mL
大提離心吸附柱 5套
通用洗柱液 100 mL
RNA洗脫液 5 mL
使用手冊 1份

運輸及保存 常溫運輸，4℃保存，有效期一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法 1. 估算組織細胞的用量。每次大量提取一般需要3-5g植物葉片、或1-3g植物種子、或5-10g植物果實。
2. 先將新鮮植物*切成小塊（保存在RNALOCKER中的植物組織需用紙吸去RNALOCKER液體后再剪切成小塊），放入50mL塑料離心管中，加入20mL溶液A，然后用勻漿器勻漿。勻漿時會產生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎植物組織，但為避免氧化，硯磨時必須將組織浸泡在溶液A中進行，不能只在液氮中硯磨，然后再將硯磨物轉移至干凈的50 mL塑料離心管中。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀*溶解并充分搖勻后再取用。
3. 在離心管中加入5 mL的溶液B和5 mL自備氯仿，在振蕩器上充分振蕩1-3分鐘，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
4. 室溫12000-15000 g離心3-5分鐘，水相和有機相之間將有較厚的細胞破碎物。
5. 將上清液轉移到另一干凈的50mL塑料離心管中。下層有機相和中間層含有DNA、蛋白質和其他雜質，避免觸及或吸取。留下少量上清液不取。
6. 加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。
7. 將一半的溶液轉移到大提離心吸附柱中，13000-15000 g室溫離心3-5分鐘，棄穿透液。
8. 將剩下的一半溶液轉移到同一大提離心吸附柱中， 13000-15000 g室溫離心3-5分鐘，棄穿透液。
9. 加10 mL通用洗柱液，室溫離心3-5分鐘，棄穿透液。
10. 重復上步一次，加10 mL通用洗柱液，室溫離心3-5分鐘，棄穿透液。
11. 室溫離心1-3分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。
12. 將大提離心吸附柱轉移到一個自備的RNase-free收集管中，加入0.5 mL RNA洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
13. 13000-15000 g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品。
14. 再加入0.5 mL RNA洗脫液，重復上面兩步一次。
15. 將兩次洗脫得到的RNA立即使用或存放于-80℃待用
16. RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子（BioTechniques，28：414，2000）。
17. RNA產量產率測定：將5-10 μL RNA溶于TE緩沖液中（pH7.5-8.2之間）檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度（1 OD260的RNA=40 μg/mL），進而計算出RNA的產量（濃度X體積）和產率（RNA產量/組織用量）。
18. RNA純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間（具體數值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關），高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質污染，但一般不影響RT-PCR等反應。