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液相色譜定量分析原理

閱讀:2608        發(fā)布時(shí)間:2020/11/28
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液相色譜定量分析原理

液相色譜定量分析原理

在定性的基礎(chǔ)上定量,需有純物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)物

液相色譜定量是相對(duì)定量的方法:即由已知量的純標(biāo)樣推算混合物中被測(cè)物的量

定量的依據(jù)是:

  • 被測(cè)組分的量與響應(yīng)值(峰高或峰面積)成正比

  • 由已知量的標(biāo)樣可求得定量校正因子

  • 定量校正因子:是定量計(jì)算公式中的比例常數(shù),其物理意義是單位響應(yīng)值(峰面積)所代表的被測(cè)組分的量

  • 測(cè)定未知組分的響應(yīng)值,通過(guò)定量校正因子即可求得其含量

 

液相色譜定量分析的步驟

1、選擇一個(gè)適合定量分析的色譜方法:

  • 確認(rèn)被檢測(cè)組分峰,并達(dá)到分離度(R)大于1.5

  • 確定被測(cè)組分色譜峰的一致性(純度)

  • 確定方法的檢測(cè)限及定量限;靈敏度及線(xiàn)性范圍

2、用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品建立校正曲線(xiàn)

3、考查定量方法的準(zhǔn)確度及精密度

4、用相應(yīng)的色譜管理軟件實(shí)施樣品采集,數(shù)據(jù)處理及報(bào)告結(jié)果

確認(rèn)定量峰的一致性

確認(rèn)色譜峰的一致性(純度)

  • 保證每個(gè)色譜峰下只有一個(gè)被測(cè)的組份

  • 檢查是否有共流出的物質(zhì)(雜質(zhì))干擾

色譜峰一致性(純度)確認(rèn)的方法

  • 用光電二極管矩陣(PDA)檢測(cè)器比較光譜圖

  • 峰純度鑒定

  • 2996的純度角理論

常用的定量方法

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法,分為外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法:

外標(biāo)法:在液相色譜中用得*多

內(nèi)標(biāo)法:準(zhǔn)確,但是麻煩,在標(biāo)準(zhǔn)方法中用得*多

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