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實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)
實時熒光定量PCR技術(shù)即是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR避免了傳統(tǒng)PCR以終產(chǎn)物檢測定量產(chǎn)生的偏差,提高實驗的重復(fù)性。該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化;比較不同組織的 mRNA表達(dá)差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結(jié)果等。
SYBR Green熒光染料法
SYBR Green是一種DNA結(jié)合染料,能非特異地?fù)饺氲诫p鏈DNA中去。在游離狀態(tài)下,它不發(fā)出熒光,但一旦結(jié)合到雙鏈DNA中以后,便可以發(fā)出熒光。它的zui大優(yōu)點就是可以與任意引物、模板相配合,用于任意反應(yīng)體系中。從經(jīng)濟(jì)角度考慮,它也比其它的探針的價格要便宜得多。但由于它能與所有的雙鏈DNA結(jié)合,所以一旦反應(yīng)體系中出現(xiàn)非特異擴(kuò)增,那它就會影響到定量結(jié)果的可靠性與重復(fù)性。要避免這種不利因素,可以通過選擇良好的引物并優(yōu)化反應(yīng)條件以消除非特異性影響。
TaqMan熒光探針法
PCR擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時,Taq酶的5-3外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。
項目 | 價格(元) | 說明 |
引物設(shè)計合成 | 300元/對 | 客戶提供基因名稱(中英文全稱)。 |
RT-PCR檢測(普通電泳PCR) | 100元/樣本/指標(biāo) | 包括所有試劑,提供分析數(shù)據(jù)、步驟。 |
實時熒光定量(Taqman探針法) | 200元/樣本/指標(biāo) | 包括所有試劑,提供分析數(shù)據(jù),圖片、步驟(20例起) |
SYBR Green 染料法 | 120元/樣本/指標(biāo) | 包括所有試劑、提供數(shù)據(jù)、圖片、實驗步驟。 |
上海卡努代做實驗項目:
一、分子生物學(xué)檢測服務(wù)
1、 引物設(shè)計合成(人、大鼠、小鼠、兔等)
2、 基因表達(dá)水平檢測、內(nèi)參檢測
3、 SNP檢測服務(wù)
4、 甲基化檢測服務(wù)
5、 測序技術(shù)服務(wù)
6、 芯片檢測(全基因、MicroRNA)
7、 染色體分析
二、病理形態(tài)學(xué)檢測
1、 HE、特殊染色(PAS、MASSON等)
2、 電鏡(透射、掃描、免疫透射等)
3、 免疫組化(陽性表達(dá)部位、陽性面積、陽性細(xì)胞計數(shù)、微血管密度、
淋巴管密度、光密度等)
4、 TUNEL研究細(xì)胞凋亡,常規(guī)病理細(xì)胞形態(tài)分析
5、 組織芯片
6、 原位雜交(DNA、RNA、MicroRNA等)
三、蛋白質(zhì)技術(shù)服務(wù)
1、 免疫印跡(Western-blotting)分析
2、 蛋白質(zhì)組學(xué)
3、 凝膠遷滯實驗(EMSA)分析DNA或RNA結(jié)合蛋白
四、免疫學(xué)檢測服務(wù)
1、 酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)
2、 放射免疫(RIA)
3、 化學(xué)發(fā)光
4、 常規(guī)生化檢測
五、代謝組學(xué)
1、 GC-MS、LC-MS、NMR
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