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技術(shù)文章

補體B因子(Bf)遺傳多態(tài)性的檢測

閱讀:557發(fā)布時間:2012-3-3

1.原理與方法基本上和C4高壓電泳及免疫固定技術(shù)一致,樣本不需經(jīng)神經(jīng)氨酸酶和羧肽酶B處理,電泳時直接加10uL EDTA抗凝血漿。凝膠板規(guī)格為125mmX260mmX3mm,電泳時電壓控制在85mA,時間3~4h或血紅蛋白遷移至離加樣孔5.5em處時,停止電泳。用1:4或1:2稀釋的抗Df血清(AtlanticAntibodiesTATB,USA或上海長征醫(yī)院產(chǎn)品)進行免疫固定。依照Mauff提出的BF定型圖命名。

2.所需試劑 *緩沖液:*34。56g,NaOH6.00g,*1.23g,加蒸餾水至
2Lo此溶液為電泳緩沖液。

1%瓊脂糖的配制:稱取1.0g瓊脂糖(1CN或SEAKEM.M.E)加*緩沖液66mL,然后加蒸餾水至100mL,隔水煮沸或微波爐中加熱至瓊脂糖*溶解透明為止。

3.操作 同C4免疫固定。


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