細胞標(biāo)本的制備方法有印片法如下。穿刺涂片法、沉淀法及活細胞標(biāo)本的制備等，現(xiàn)分述：
（一）印片法
常用于手術(shù)切除標(biāo)本。將新鮮標(biāo)本沿病灶中心切開，將蓋玻片壓在病灶上，細胞即可附肝脾胰腎于載玻片。吹干或自然晾干后立即置于固定液內(nèi)10～15min，取出后自然晾干，低溫保存?zhèn)溆谩?br />印片法操作簡便，抗原保存好。缺點是有時細胞厚薄不均，并且載玻片上組織液較多，可能會影響標(biāo)記結(jié)果。
（二）穿刺涂片法
常用于體表腫瘤以及肝、腎、肺、后腹膜腫瘤等穿刺。如穿刺液較少，可直接涂于載玻片，注意涂抹均勻；如穿刺液較多，細胞較豐富，可滴入裝有1—2ml Hanks液（或RP—M11640液）的試管內(nèi)，以500r／min低速離心10～15min，棄上清，吸取1—2滴沉淀物滴在載玻片上，鏡下觀察細胞排列較密而不重疊為宜，自然晾干后固定。
穿刺法操作簡便，細胞形態(tài)保持較好，但細胞分布不均勻。
（三）沉淀法
主要用于尿液、胸腹水、腦脊液等體液多而細胞少的標(biāo)本，其制備方法有二種。
1．常規(guī)制備法
根據(jù)標(biāo)本內(nèi)細胞量的多少用不同的方法。如果細胞較多，液體渾濁，可吸取1—2滴直接涂在載玻片上，并注意涂均勻；如果細胞較少，可吸取瓶底自然沉淀液5ml，1500～2000r／min離心10min后，倒掉上清液，吸取1—2滴沉淀涂在載玻片上。如有細胞離心涂片器，可將標(biāo)本用上述離心法制成2X105個細胞／ml的細胞懸液，吸取50gl加入涂片器內(nèi)，離心后即制成分布均勻的細胞玻片。細胞分布在直徑6mm的小圈內(nèi)，每個圓圈內(nèi)的細胞數(shù)約10s個。
2．單核細胞分離法
主要用于周圍血或胸腹水中淋巴細胞的免疫細胞化學(xué)標(biāo)記，以鑒別B淋巴細胞性白血
病、T淋巴細胞性白血病或惡性淋巴瘤。如為血性胸腹水，標(biāo)本經(jīng)1500r／min離心10min后棄上清，在沉淀中加15ml RPMll640培養(yǎng)液，再用淋巴細胞分離液分離單核細胞。在5mlRPMll640培養(yǎng)液內(nèi)于37℃培養(yǎng)30min后，離心沉淀，取上清，制成濃度為2X106個細胞／ml的細胞懸液，吸取50gl滴于載玻片上，略干，固定10min，取出晾干后備用。
3．注意事項
（1）在制備過程中，因反復(fù)離心洗滌后細胞黏附性較差，易脫片，因此載玻片應(yīng)預(yù)先涂黏合劑。
（2）為節(jié)省試劑和便于觀察，制片時細胞應(yīng)集中在直徑在o．6～1．0cm的圓圈內(nèi)，細胞總數(shù)以105個為宜。
（3）富于黏液的標(biāo)本，如痰液、食管拉網(wǎng)、胃液等，未經(jīng)處理時不宜做免疫組化標(biāo)記。
（四）活細胞標(biāo)本的制備
活細胞標(biāo)本一般用于單克隆抗體的篩選、細胞骨架蛋白的定位研究。標(biāo)本來源主要是建株細胞、培養(yǎng)細胞、外周血等。細胞可直接培養(yǎng)在蓋玻片上、培養(yǎng)瓶內(nèi)或培養(yǎng)板上，也可將一定量的細胞收集離心進行涂片。不管任何形式，在進行免疫組化標(biāo)記前均需反復(fù)洗滌，乙醇、丙酮或4％多聚甲醛固定。乙醇、丙酮固定5～15min，4％多聚甲醛固定3～5min?；罴毎麡?biāo)本固定后應(yīng)立即進行免疫組化定位。
