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技術(shù)文章

培養(yǎng)基上微生物生長(zhǎng)特性測(cè)定

閱讀:647發(fā)布時(shí)間:2015-7-14

1生長(zhǎng)率

將適量測(cè)試菌株的工作培養(yǎng)物接種至固體、半固體和液體培養(yǎng)基中,每種培養(yǎng)基上菌株的生長(zhǎng)率應(yīng)達(dá)規(guī)定的zui低限值。

1定量方法

生長(zhǎng)率PR的計(jì)算:             PR = NS/NO

NS:從一個(gè)或多個(gè)待測(cè)培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)。

N0:從一個(gè)或多個(gè)規(guī)定的參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù)(該菌落總數(shù)應(yīng)≥100cfu )。

要求:非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率zui低應(yīng)為0.7,該類培養(yǎng)基應(yīng)易于目標(biāo)菌生長(zhǎng);選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率zui低應(yīng)為0.1;每平板(或每試管)的接種水平為10CFU~100CFU。

2 半定量方法

半定量方法采用生態(tài)測(cè)量技術(shù)在平板上劃線,平板板連續(xù)劃線區(qū)域得分的總和即為生長(zhǎng)指數(shù)G,G值不應(yīng)超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的允許范圍。

3 定性方法

定性方法采用劃線法觀察。

①選擇性

將濃度為104CFU/mL~106CFU/mL的非目標(biāo)菌工作菌株懸浮液接種至選擇培養(yǎng)基和參考培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基的選擇性應(yīng)達(dá)到規(guī)定值。

②定量方法

選擇因子SF:          SF = DO - DS

DO:能在參考培養(yǎng)基上生長(zhǎng)至少10個(gè)菌落的zui高稀釋度

DS:能在測(cè)試培養(yǎng)基上顯示生長(zhǎng)的zui高稀釋度 

要求:非目標(biāo)菌在選擇性培養(yǎng)基上的SF至少為2 ;半定量和定量法中,非目標(biāo)菌應(yīng)部分或全部被抑制。

③生理生化特性(選擇性和特異性)

規(guī)定培養(yǎng)基的基本特性,使用一套適當(dāng)?shù)臏y(cè)試菌株對(duì)培養(yǎng)基上的目標(biāo)菌的生理生化特性(菌落形態(tài)、大小等)和非目標(biāo)菌的被抑制程度進(jìn)行測(cè)試。


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