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上海酶聯(lián)生物研究所


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支原體即霉形體的培養(yǎng)

閱讀:1170發(fā)布時間:2010-8-24

 

解脲脲原體(UU)是耐酸不耐堿的,UU培養(yǎng)的原理是在于其菌體中含有脲酶,而UU培養(yǎng)基中含有尿素,UU的生長需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì),UU培養(yǎng)基中含有指示劑酚紅,由于尿素被分解釋放出氨從而使培養(yǎng)基變堿而使培養(yǎng)基由黃變紅,但是這種紅是一種清亮的紅色,透明澄清無渾濁,UU其適宜的PH值為6.2-6.5,由于尿素分解產(chǎn)氨是PH上升,UU在PH值大于7的條件下會迅速死亡,因此,在培養(yǎng)時要隨時觀察其液體培養(yǎng)基的PH值,一旦看到培養(yǎng)基變紅,要立即取出,以防培養(yǎng)基PH上升導(dǎo)致UU死亡,一般UU需要在培養(yǎng)至對數(shù)生長期時是活力zui強的時候(培養(yǎng)基呈橙紅色變化)。一般UU生長需要24小時。

另外,UU生長所需要的培養(yǎng)基的成分一般每隔單位有所不同,但是有一點肯定,就是需要小牛血清。

解脲脲原體培養(yǎng)基配制:(在自制培養(yǎng)基基礎(chǔ)上加:)PH:6。13
  小牛血清:30ml/250ml
  10%尿素:12 ml/250ml
  0.2%酚紅:4。5 ml/250ml
  *G:50萬U/250ml
  酵母:6。25 g/250ml
  磷酸二氫鉀:0。375 g/250ml
  天門冬素:0。025 g/250ml

自制培養(yǎng)基包括:新鮮牛肉浸液:90毫升
  蛋白胨:1克
  氯化鈉:0。5克
  磷酸二氫鉀:0。15克
  (此自制培養(yǎng)基可以高壓滅菌)。
  加瓊脂配成固體,一般1%即可! 
 


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