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上海酶聯(lián)生物研究所
上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：618發(fā)布時間：2010-7-1
有關(guān)血清使用中的常見問題
1.保存血清的辦法？
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
2.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損？
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后，先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理？
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的；而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管中，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4.何謂熱滅活？有必要做熱滅活嗎？
一般以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活性，而補體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)過處理的血清對細(xì)胞生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。
而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴增。
因此建議若非必須，可以不需要做熱滅活這一步。如此以來更確保血清的質(zhì)量。
5.如何避免沉淀物的出現(xiàn)？
建議在使用血清的時候，注意正確的血清解凍步驟，并盡量避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環(huán)境中。
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