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上海酶聯(lián)生物研究所
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上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：798發(fā)布時間：2010-4-20
高等植物多肽激素CLAVATA3（CLV3）對于植物莖端分生組織干細(xì)胞數(shù)目的維持起著極其重要的作用。過去幾十年來，CLAVATA1/CLAVATA2 （CLV1/CLV2） 復(fù)合體被認(rèn)為是CLV3多肽在細(xì)胞膜上的*受體。 然而zui近的遺傳學(xué)分析篩選到了一個新的受體蛋白激酶成員—CORYNE（CRN），并且發(fā)現(xiàn)它在CLV3信號途徑中起著非常重要的作用。在一系列遺傳學(xué)分析的基礎(chǔ)上，新的CLV3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路假設(shè)被提出：即CLV1同源二聚體與CLV2/CRN異源復(fù)合體可能平行獨(dú)立地介導(dǎo)CLV3信號。 然而，新的假設(shè)僅僅停留在遺傳學(xué)上的預(yù)測，仍然缺乏進(jìn)一步的生物化學(xué)和細(xì)胞學(xué)的證據(jù)。為了更好地理解這三個可能的受體蛋白之間的相互關(guān)系，林金星研究組利用新型的活體下檢測蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)—螢火蟲熒光素酶互補(bǔ)技術(shù)（Firefly luciferase complementation imaging assay, LCI） 在擬南芥葉肉原生質(zhì)體 （Arabidopsis mesophyll protoplasts） 和煙草葉片 （Nicotiana benthamiana leaves） 兩個體系中分析了CLV1, CLV2和CRN三個受體蛋白之間的相互作用。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：LCI技術(shù)和免疫共沉淀技術(shù) （Co-immunoprecipitation assay） 都證實(shí)了CLV2在沒有CLV3多肽刺激的情況下可以直接地與CRN發(fā)生相互作用；外源的CLV3多肽處理，并不會明顯地影響CLV2-CRN之間的互作強(qiáng)度；進(jìn)一步的LCI實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)CLV1不能夠與CLV2發(fā)生直接的相互作用，但能夠與CRN有微弱的相互作用；除此之外，實(shí)驗(yàn)人員還發(fā)現(xiàn) CRN自身可以形成同源二聚體，而CLV1或CLV2自身不能形成同源二聚體。這些生化和細(xì)胞學(xué)結(jié)果對于新提出的CLV3平行雙通路假設(shè)提供了直接的證據(jù)。
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