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閱讀:49發(fā)布時(shí)間:2022-9-25
為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率,制備色譜的的進(jìn)樣品量很大,導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大,也就必須加大色譜柱填料,增大制備色譜的直徑和長(zhǎng)度,使用的相對(duì)多的流動(dòng)相。
我們?cè)?strong>半制備液相色譜時(shí),常用的裝柱方法是什么呢?一起來(lái)看下。
根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸,采用不同的裝柱方法,往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關(guān)系很大,顆粒度的減少會(huì)導(dǎo)致裝柱的難度。
1.濕法裝填:一般來(lái)說(shuō),顆粒直徑小于20-30um的固定相采用濕法裝填。
2.敲擊-裝填:所謂“敲擊-裝填”技術(shù)適用于顆粒直徑大于25um的固定相。
3.濕法:濕法的目的是迫使相對(duì)稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子,從而減少空隙的形成。
4.當(dāng)柱直徑大于20mm,所加壓力為30-40bar時(shí),高壓懸漿裝填技術(shù)就變得十分復(fù)雜,為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱,可采用柱長(zhǎng)壓縮技術(shù)。這種方法,先將固定相懸漿(或偶爾是干填充物)裝入柱中加壓,利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種:徑向壓縮和軸向壓縮。 濕法裝柱需要一定的設(shè)備,在柱子填完后,應(yīng)用有柱效的測(cè)量,對(duì)柱效低的柱子應(yīng)該重填。
以上是半制備液相色譜常用的裝柱方法,客戶可以根據(jù)自身的實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇。
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