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液相色譜儀色譜柱的分離條件

閱讀:40發布時間:2022-9-23

  多數液相色譜儀色譜柱有很寬的試驗條件范圍,但具體應用又受到限制,主要是pH值、柱溫和流動相的選擇。

  傳統硅膠為基質的鍵合相要求pH值在2~8之間,pH值的流動相能“溶解"硅膠,使鍵合相流失。結構非堿性組分的保留不斷減少,堿性組分的保留增加,引起堿性組分峰變寬。如果一定要用高或低pH值的流動相,可加保護柱。保護柱裝在泵和進樣閥之間,用分析柱相同的填料填裝,或用普通硅膠。硅膠飽和了流動相,減少了分析柱填料的損失。保護柱不要求柱效高,用價格低的一般硅膠疏松的填裝,按期檢查硅膠的溶解情況。用保護柱也有不利的影響,即新流動相難以平衡,保留時間不穩定或穩定慢。使用了保護柱一定要加流路過過濾器,以防止硅膠微粒引起的麻煩。目前很多檢測儀器廠商開發了滿足低或高pH值緩沖液的色譜柱填料,具有很好的穩定性。

  以硅膠為基質的柱和陰離子交換柱超過60℃后,會增加對流動相中化學物質的吸附。在高溫下用小顆粒柱引起床塌陷,降低柱效,改變峰形。

  有些流動相中的溶劑不能用于某些柱,如小顆粒的聚苯乙烯填料不能用于非水的排阻色譜。另一方面,有些柱與某些溶劑一旦達到平衡,不要隨意改用其它溶劑。


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