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操作規(guī)程一、復(fù)蘇1、事先用Matrix進(jìn)行培養(yǎng)皿/板的包被處理。平時(shí)Matrix保存在-20℃,使用之前放在4℃冰箱或冰上進(jìn)行解凍。待Matrix解凍后,按1:100的比例迅速用PBS液體稀釋。按6孔板每孔加1ml,150px皿加2ml,250px皿加3ml的量加入,加入后迅速搖動(dòng)皿/板,使加入的Matrix*覆蓋整個(gè)皿底。放到37℃培養(yǎng)箱中4小時(shí),使用前去掉包被液(如果暫時(shí)不使用,用封口膜密封,在4℃冰箱能保存一周)。2、復(fù)蘇前準(zhǔn)備iCell解凍*培養(yǎng)基(iCell解凍液基礎(chǔ)培養(yǎng)基以及iCel
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一、食品安全檢驗(yàn)ELISA試劑盒是指食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過(guò)敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測(cè)產(chǎn)品。包括植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒,以及動(dòng)植物疾病診斷類(lèi)如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類(lèi)以及寵物類(lèi)檢測(cè)試劑盒。二、生物原裝ELISA試劑盒以及各類(lèi)國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒1.內(nèi)分泌檢測(cè)ELISA試劑盒如甲狀腺,胰腺,性激素,孕酮,睪酮,生長(zhǎng)激素,生長(zhǎng)抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,促腎上腺皮質(zhì)激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇,5-羥色胺,1
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ELISA實(shí)驗(yàn)中如何進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇呢?
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:1.固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。2.包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影 -
勁馬文獻(xiàn):小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)
【文獻(xiàn)標(biāo)題】Starvationduringpregnancyimpairsfetaloogenesisandfolliculogenesisinoffspringinthemouse【發(fā)表單位】青島農(nóng)業(yè)大學(xué)(QingdaoAgriculturalUniversity)【作者】Jun-JieWang,Xiao-WeiYu,Rui-YingWu,etal.【影響因子(IF)】IF:8.0【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒【DOI】doi.org/10.1038/s41419-01 -
1.解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2.解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生3.請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。5.若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久
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在細(xì)胞培育試驗(yàn)中,血清一般作為基礎(chǔ)生長(zhǎng)培育基的添加劑。而在試驗(yàn)進(jìn)程中是否挑選添加血清,主要依據(jù)基礎(chǔ)培育基化學(xué)成分,培育細(xì)胞的類(lèi)型和培育系統(tǒng)而定。血清的質(zhì)量大大的影響到試驗(yàn)作用。一:血清的采集在出產(chǎn)進(jìn)程中,全血運(yùn)用無(wú)菌一次性塑料袋搜集,待凝聚后分離,搜集和冷凍貯存血清。操控初始搜集是操控best終血清產(chǎn)質(zhì)量量的關(guān)鍵因素。只要初始質(zhì)料符合咱們的規(guī)范時(shí)才干答應(yīng)出產(chǎn)。二:產(chǎn)質(zhì)量料的挑選在商場(chǎng)存在兩個(gè)胎牛血清規(guī)范:美國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)范(USDA)和歐洲規(guī)范。美國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)范,原始血清必須采自未發(fā)生瘋牛病(BSE)
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MTT法又稱(chēng)MTT比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在540或720nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、
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血球計(jì)數(shù)板被用以對(duì)人體內(nèi)紅、白血球進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)之用,也常用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量,是一種常見(jiàn)的生物學(xué)工具。使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí),先要測(cè)定每個(gè)小方格中微生物的數(shù)量,再換算成每毫升菌液(或每克樣品)中微生物細(xì)胞的數(shù)量。1.視待測(cè)菌懸液濃度,加無(wú)菌水適當(dāng)稀釋(斜面一般稀釋100倍),以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。2.取潔凈的血球計(jì)數(shù)板一塊,在計(jì)數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。3.將菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計(jì)數(shù)板中間平臺(tái)兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過(guò)多),讓菌懸液利用液體的表面張