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  • ELISA操作步驟

    1.包被過程(注意設置空白對照,陰性對照):將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發,板上應加蓋或將板平放在底部有濕紗布的金屬濕盒中)2.封閉酶標反應孔:5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.洗滌方法:吸干孔內反應液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內液,傾去液體后在吸
  • 山羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒反應五要素

    參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易
  • 上海勁馬讓您了解 ELISA試劑盒變質的七大原因

    ELISA試劑盒變質是ELISA實驗中比較常見的問題,那么,ELISA試劑盒變質是因為什么呢?是什么影響了ELISA試劑盒質保?一旦變質會有什么影響呢?今天勁馬小編為大家詳細分析下。Ⅰ、方法學的影響ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。Ⅱ、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量*一致,即使是通過批批
  • 凍存的原代細胞應該如何培養

    原代細胞(primaryculturecell)是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等。一、凍存原代細胞的培養1.將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。2.將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉,直到管內物體*融化。3.將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉入無菌環境。4.用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦
  • ELISA曲線怎么擬合呢?

    有很多客戶向我們咨詢ELISA實驗后如何進行曲線制作?那么對于那么多的曲線計算公式,該如何選擇*的擬合方程呢?今天上海勁馬的技術員就給大家總結下:ELISA曲線擬合的那些事。我們一般可以用軟件繪制也可以通過excel進行制作。按照科學分析方法,如果存在奇異點或者污點,直接采用線性分析不是很好,要對擬合曲線的幾個點進行取舍,同時也可以改用雙對數直線擬合或者四參數曲線擬合。那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種:第yi種是直線回歸:直線回歸是簡單的回歸模型,也是zui基本的曲線擬合回歸分析方法,將
  • 血清的制備與使用

    一、血清的制備方法問題。1、問:我的實驗需要自己制備一些血清用于培養細胞,有沒有人知道用于培養細胞的血清需要怎樣的制備過程?答:自己制備血清當心污染啊。如果無菌條件好的話,用靜置析出方法就行。2、問:一般我們用得胎牛血清用前還要滅活,我想用大鼠的血,不知道要不要滅活?答:你直接把采來的血液在離心管里4℃過夜,離心,取上清,在無菌過濾,也可滅活,然后分裝凍存,用時再配。3、問:如果滅活會不會對血清中的一些因子有損傷?答:加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板
  • 勁馬產品羊口瘡病毒(ORFV)ELISA試劑盒使用說明書

    一、參數規格【產品名稱】:勁馬產品羊口瘡病毒(ORFV)ELISA試劑盒使用說明書【供貨期】:1-3天(現貨供應)【產品用途】:被測樣品定性定量分析【產品規格】:96T/48T(兩種規格)【檢測方法】:酶免法/酶聯免疫法(ELISA)【保存條件】:2-8℃【產品性狀】:液體盒裝【產品價格】:(含稅含運費,我們全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測)【銷售優勢】:價格行業優勢、質量可靠、如果出現客觀質量問題包換退【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房
  • 關于血清滅活的幾個問題

    1、問:加到培養基中的血清必須滅活嗎?答:不是必須的,看做什么實驗了。2、問:四季青胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎?答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。3、問:我要做滋養細胞培養,胎牛血清要滅活嗎?答:進口的一般都已滅活,國產的不一定,還是滅活一下再用較安全。4、問:我用病毒上清轉染細胞,培養用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補體和抗體,是
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