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WSZ-10地埋式污水處理設備型號
設備優勢:公司生產的設備都是采用新工藝、新技術,如:AO工藝、AB工藝、A2O工藝、MBR工藝、MBBR工藝、SBR工藝等,保證出水高于國家要求排放標準。
污水類目優勢:公司處理污水種類涵蓋生活污水、醫療污水、屠宰污水、洗滌污水、餐飲污水、塑料清洗污水、養殖污水、農村污水、電鍍污水、食品污水及相類似的工業污水。
本產品由feng于2019.7.11發布
城市生活污水主要是指城市生活中的各種餐廚污水、垃圾、糞便、洗滌劑等各種污染水體形成的混合污水,氮、磷、硫等營養元素含量較高,微生物含量高,并且含原微生物[11, 12].生活垃圾填埋場是城市生活垃圾、污水廠的處置污泥、電子廢棄物、垃圾焚燒廠飛灰殘渣等固體廢棄物的主要*終堆放場所.垃圾滲濾液是伴隨垃圾填埋場運營整個生命周期的“二次污染物”.生活垃圾滲濾液具有污染物成分復雜,污染物濃度高的特點,相較于城市生活污水,其高濃度的氨氮、有毒有害物質,重金屬離子等特征形成了一個特殊環境,尤其是場齡大于5 a的垃圾滲濾液可生化性差[13].受人類生產生活的影響,城市生活污水和垃圾滲濾液中含有抗生素殘留以及抗生素抗性的微生物,被認為是環境抗生素抗性的一個重要存儲庫[14~16].
由于垃圾滲濾深度處理后產生了難以處理的濃縮液,垃圾滲濾液(包括濃縮液)往往被運送到城市生活污水處理廠進行合并處理[13, 17].目前,城市生活污水處理過程中的抗生素抗性基因污染分布及演變有較多相關研究[18, 19],并且主要是針對磺胺類、四環素類等少數幾種抗生素抗性基因.針對城市生活污水(接收垃圾滲濾液進行合并處理)和生活垃圾滲濾液環境抗生素抗性的對比研究,從抗生素抗性譜的角度全面研究這兩者間的抗性基因污染還沒有或者比較少相關研究報道.因此,對城市生活污水和生活垃圾滲濾液中抗生素抗性種類、分布格局開展對比研究,比較兩者之間的異同,綜合分析研究城市生活污水和垃圾滲濾液抗生素抗性基因污染狀況,對于加強城市生活污水和垃圾滲濾液管理與處置,評估兩者的生態安全和環境風險顯得十分必要.
1 材料與方法
1.1 樣品采集及前處理
城市生活污水樣品于2015年7月采集自廈門市某污水處理廠(接收廈門市東部固廢處理中心生活垃圾填埋場部分的垃圾滲濾液和垃圾滲濾液處置后濃縮液)的進水樣品1 L(3個采樣平行樣品),其中添加了終濃度為50%乙醇進行預處理,用于固定污水中微生物.生活垃圾滲濾液采樣地點位于廈門市東部固廢處理中心生活垃圾填埋場,于2015年7月采集了垃圾滲濾液調節池末端,也是滲濾液處理站污水進口端樣品1 L(3個采樣平行樣品),同樣在采集樣品中添加了乙醇進行預處理.所采集的城市生活污水和生活垃圾滲濾液,存放在低溫采樣箱中并迅速轉移至實驗室的-20℃冰箱中保存,用于環境樣品的DNA提取.
1.2 城市生活污水和生活垃圾滲濾液DNA提取
量取城市生活污水(raw wastewater,RWW)和生活垃圾滲濾液(raw leachate,RLC)各40 mL,分裝到50 mL離心管中,使用12 000 r ·min-1轉速離心10 min,倒掉上清液,每個離心管中再加入1 mL生理鹽水,振蕩并懸浮起離心管底部固體,從而達到清洗效果.再將離心管中的全部樣品分別轉移至新的1.5 mL離心管中,18 000 r ·min-1轉速離心后,棄去上清液.然后加入FastDNA? Spin Kit for Soil試劑盒(MP Biomedicals,美國)中的PBS緩沖液(978 μL).
隨后將上述含有采集樣品的PBS緩沖液轉移至試劑盒中的Lysing Matrix E tube,按照生產商提供的方法提取樣品中的總DNA,然后用1%的瓊脂糖凝膠進行電泳驗證.樣品所提取的DNA樣品用QuantiFluor? dsDNA System(Promega Corporation,美國)試劑盒測定雙鏈DNA濃度.根據測定的樣品DNA濃度,實驗樣品用滅菌的超純水統一稀釋至50 ng ·μL-1.
1.3 高通量熒光定量PCR
采用SmartChip Real-Time PCR Systems(WaferGen Inc.,美國)高通量熒光定量反應平臺.研究中所采用的293對引物在先前的相關的研究中被有效驗證過[1].此外另外添加了1對用于檢定超級細菌抗生素抗性基因blaNDM-1的引物[20],1對intI 1 整合子基因(class1 integron)引物[21]和1對CintI 1臨床醫學意義上的整合子基因(clinical class 1 integon)引物[22].
PCR擴增反應的體積為100 nL.反應體系中各試劑的終濃度為: 1×的LightCycler 480 SYBR? Green ⅠMaster Mix(Roche,美國), nuclease-free PCR-grade water,1 ng ·μL-1的BSA,5 ng ·μL-1的DNA模板,1 μmol ·L-1的上下游引物. PCR反應條件為: 95℃預變性10 min;95℃變性30 s,60℃退火延伸30 s,總共40個循環;儀器程序自動升溫進行熔解曲線分析.高通量定量PCR每個芯片都有不添加DNA模板的陰性對照. qPCR反應得到的數據通過Cycler預設定的篩選條件(擴增效率介于1.8~2.2)進行導出.根據SmartChip Real-Time PCR Systems的靈敏度和度,確定循環次數CT值為31時作為儀器的檢測限.每個樣品都進行3次技術重復實驗,當3次技術重復都被擴增出來時認為是陽性擴增,3個采樣平行樣品都是陽性擴增時,認為樣品的目的基因被有效檢出.
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