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豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒技術原理

時間:2020/9/10閱讀:724
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豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒技術原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豚鼠單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)水平。用純化的豚鼠單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4),再與HRP標記的單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豚鼠單核細胞趨化蛋白-4(MCP-4)濃度。

計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      

倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數,即為樣品的實際濃度。     

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