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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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血清
ATCC細(xì)胞
質(zhì)粒
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檢測(cè)ELISA試劑盒內(nèi)在質(zhì)量的兩點(diǎn)方法

時(shí)間:2020/1/2閱讀:871
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檢測(cè)ELISA試劑盒內(nèi)在質(zhì)量的方法:

利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原

.將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen≈:2的混合孵育液

2.37℃孵育5分鐘后,代替原試劑盒

3.后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物

4.實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,ELISA試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造試劑盒。

5.如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用,則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。

 第二、在同一公司購買兩盒不同指標(biāo)ELISA試劑盒的情況下,可用交叉實(shí)驗(yàn)即可辨別

.取出購買的試劑盒A的包被板兩條。

2.一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物。

5.實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造試劑盒。

6.如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個(gè)試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測(cè)A,不能檢測(cè)B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

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