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小鼠ELISA試劑盒反應的結果判斷方法

時間:2018/8/14閱讀:997
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    小鼠ELISA試劑盒定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度,其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。 在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反應的結果判斷方法不同,分述于下。
() 間接法和夾心法 
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6)。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
a. 陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,小鼠ELISA試劑盒試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。

 C型凝集素結構域家族5成員A抗體 TNFRSF4/HVEM

 C型凝集素結構域家族6成員A抗體 TNFRSF3B

 C型凝集素結構域家族7成員A TNFRSF2A/TWEAKR

 C-藻藍素/藻藍蛋白抗體 TNF-beta

 DAP凋亡誘導蛋白激酶2抗體 TNF-alpha

 DDX4抗體 TNF-alpha

 DDX58抗體 TNF-alpha

 DEK癌基因結合蛋白 TNFAIP3

 DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體 TNFAIP

 DISC C端抗體 TMEM66

 DISC N端抗體 TMEFF2
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