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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的方法

時(shí)間：2017/7/4閱讀：1053

在抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗體的選擇：將抗體吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。
（3）酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法"在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
（4）抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
20(S)-人參皂苷-RH2   含量:   ≥98%   20(S)-Ginsenoside-RH2   進(jìn)口/國產(chǎn)
23-羥基白樺酸   含量:   ≥98%   Anemosapogenin   現(xiàn)貨供應(yīng)
25-羥基-原人參二醇   含量:   ≥97%   25-OH-Protopanaxdiol   *
25-羥基-原人參三醇   含量:   ≥97%   25-OH-Protopanaxtiol   進(jìn)口，*
3,6’－二芥子酰基蔗糖   含量:   ≥95%   3,6’－Disinapoyl sucrose   進(jìn)口/國產(chǎn)
3’-甲氧基   含量:   ≥99%   3’- Methoxy Puerarin   現(xiàn)貨供應(yīng)
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的方法

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