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南京信帆生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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信帆生物帶你了解HEPES緩沖液不同配制

時(shí)間:2016/12/16閱讀:1497
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化學(xué)名:2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid

分子式:C8H18N2O4S      HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。其zui大優(yōu)點(diǎn)是在開(kāi)放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀(guān)察時(shí)能維持較恒定的PH值.在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中.大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色.HEPES有些昂貴,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒. 原則上,HEPES作為緩沖劑可用來(lái)代替碳酸氫鹽,以解除需要高濃度CO2培養(yǎng)環(huán)境的限制.實(shí)際操作中并非如此簡(jiǎn)單. 溶解的CO2與碳酸氫鹽對(duì)良好的細(xì)胞生長(zhǎng)也是很重要的。     HEPES buffer緩沖溶液的配制方法關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制,不同的文獻(xiàn)資料有不同的說(shuō)法。根據(jù)用途,一種是單純的HEPES+NaOH,另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下:     (1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過(guò)濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 調(diào)pH至7.2,濾過(guò)除菌后使用.此時(shí)HEPES的使用濃度為10 mmol/L.    (2)亦可配成 100 x 貯存液(l mol/L),使用前取 99ml培養(yǎng)液加入 lml貯存液,zui終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES貯存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中,用lN NaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過(guò)濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.

   用途:對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑,能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L,一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。

  信帆生物專(zhuān)業(yè)生物試劑銷(xiāo)售HEPES緩沖液,高提純技術(shù),安全保障,咨詢(xún)訂購(gòu)!

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