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白細胞稀釋液(計數液)使用步驟

時間:2024/4/30閱讀:431
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白細胞稀釋液(計數液)使用步驟

產品簡介:

白細胞(White Blood Cell,WBC)是血液中的一種常見的免疫細胞。

白細胞稀釋液(WBC Dilution)主要由乙酸、亞-甲藍等組成,主要用于白細胞計數,但并不能區分不同種類的白細胞,作用原理是血液經白細胞稀釋液稀釋后成熟紅細胞全部被溶解,充入計數池后顯微鏡下計數一定體積內白細胞數,換算求出每升血液中白細胞的數量。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

 

自備材料:

1、新鮮全血、微量吸管、血球計數板、血蓋片、顯微鏡、小號試管

 

操作步驟(僅供參考):

1、取小號試管,加 WBC Dilution 0.38ml。

2、用潔凈干燥微量吸管取末梢血 20μl,擦去管外余血后加至 WBC Dilution 底部,輕輕將血放出,再輕吸上層清液清洗吸管 2~3 次,立即混勻,稀釋比例為1:20,也可以按照 1:10 或 1:40 的比例稀釋。

3、待紅細胞完-全破壞,液體變為棕褐色后,再次混勻后充池,注意產生氣泡或外溢,室溫靜置 2~3min,待白細胞沉淀。

4、置于顯微鏡低倍鏡下依次計數四角和 4 個大方格內的白細胞數,壓線細胞按“數上不數下,數左不數右"的原則進行計數。

 

計算:白細胞數/L=(N÷4)×10×20×106=(N÷20)×109

 image.png

注意事項:

1、采血時不能過于擠壓,針刺深度應適當。

2、小試管、計數板均應清潔,以免誤認細胞。

3、在參考范圍內大方格間的細胞數不應相差 8 個以上,兩次重復計數相差不應超過10%。4、白細胞數量過多時可加大稀釋倍數,白細胞數量過少時可計數 個大方格的白細胞數或大量取血。

5、白細胞稀釋液僅可計數白細胞,并不能區分不同種類的白細胞,如需區分白細胞應選用瑞氏染色液或者瑞氏-姬姆薩復合染色液。

6、試劑開封后請盡快使用,以防影響后續實驗效果。

7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。



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