目前常用的固定系統有：

    4%聚甲醛，1.5%-2%戊二醛，1%多聚甲醛+1%戊二醛，4%多聚甲醛+0.5%苦味酸+0.25%戊二醛，96%乙醇+1%醋酸。不論采用哪些系統，使用前必須用已知效價的抗原做一系列預實驗。如固定劑的種類濃度、溫度、pH及固定時間等。然后做出預處理的效價，作為失活參考以再選擇zui適條件。

非特異性吸附 

    非特異性吸附與酶標抗體、抗血清的稀釋度、染色時間，溫度及介質等有關，其中zui主要的是抗血清及標記抗體的稀釋。一般認為價抗血清或標記抗體稀釋到低蛋白濃度，用于標記染色可獲得的結果。因為低蛋白濃度有利于降低非特異性吸附。實際應用的蛋白濃度大致在0.50mg/ml-2mg/ml。工作效價一般在1︰20-1︰400,在實際工作中，將標記抗體或抗血清稀釋到1︰100倍以上則可獲得理想的陽性結果，而非特異性吸附必然降得很低。

    工作濃度的選擇是將標記抗體或抗血清作1︰2、1︰4、1︰8……1︰256的稀釋，做已知陽性標本的標記染色觀察，取其陽性沉積物明顯，而非特異性吸附zui低的一稀釋度做為工作濃度。

標記染色法 

    標記染色法分為直接染色法與間接染色法兩種。前者的特點是特異性較高，敏感性低，標記抗體只能用于檢測一種抗原。后者敏感性較強，一種標記抗體可用于多種抗原的檢測。缺點是特異性較差。