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上海一研生物科技有限公司

常規切片的浸蠟、包埋和磨刀技術

時間:2015-6-24閱讀:1492
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浸蠟
組織透明后,在熔化的石蠟內浸漬的過程稱為浸蠟。用其他浸透劑(如火棉膠、明膠等)滲入組織內部的過程可稱為浸透或透入。浸蠟溫度過高(超過60℃),在蠟內加入二甲苯蠟或由于透明時帶進的二甲苯過多,都會導致組織發硬,還會使組織內的抗原受到破壞;所以作者主張浸蠟用的石蠟熔點在56℃(三道),*道:石蠟30分鐘;第二道:石蠟90分鐘;第三道:石蠟,90分鐘。浸蠟溫度控制在56~58℃左右。(*道也可用硬脂酸石蠟1:3混合浸蠟,不僅可軟化組織,特別適用于比較韌、硬的組織,而且由于硬脂酸是弱酸性的,對細胞核有媒染作用,核漿比鮮明,但容易脫片;同時對疏松組織容易散片)。有條件的可以每天打開*道石蠟的蓋子,讓二甲苯揮發。浸蠟所用的石蠟如有雜質盡可能過濾,以防附在組織上,造成切片刀刀口受損,或切片破碎和劃痕增多。細胞

 包埋
用包埋劑來支持組織的過程稱包埋。zui常用的是石蠟包埋法。包埋的關鍵一是平整,二是方位。要求在包埋時,應采用鑷子輕壓組織塊拱起部份,使之平貼于底部,通常采用組織的zui大面包埋。囊壁、管腔組織應豎直包埋。小塊多顆組織,應盡量放在一起,并保證在一個平面上。修去兩邊的余蠟(所謂的兩邊,指切片時與切片刀垂直的兩側)。包埋時還應注意有無縫線,紙絮,如有一定要去除。胃黏膜活檢標本,不能按一般的規律取zui大包埋面,應采取窄面豎起包埋。包埋的蠟更應過濾,留有雜質的石蠟,容易造成污染或刀口受損。蠟的熔點應在56~58℃之間選擇,不提倡在冬天使用軟蠟。因為用軟蠟包埋的蠟塊,到了夏天,會粘在一起,不利于資料的保存,而且即使在冬天,用硬蠟包埋的蠟塊也比用軟蠟包埋的蠟塊要好切。

 磨刀
要想切好一張切片,首先要有一把鋒利的切片刀。磨刀是從事切片技術人員的一項zui基本技術,刀磨的好壞,直接關系到切片的質量。磨刀的手法各人不同,但都要求用力均勻,使刀口和磨刀石全面接觸,兩手的用力點應在刀口上,而不是在刀背上。切片刀應用一次磨一次,每次僅需10~15分鐘,過長時間的磨刀,容易把已經磨出的鋒刃磨掉,檢查切片刀是否鋒利,用手試摸刀口的方法并不十分科學,不僅不能證明切片刀是否真正鋒利,細胞而且容損害刀口,zui簡單的辦法是每次磨好后拿一個蠟塊試切一下。每次磨好刀后,應將磨刀石用蓋子蓋好,以防灰塵掉在磨刀石上,用有灰的磨刀石磨刀,會使切片刀產生許多細小的缺口。現在很多單位都買了磨刀機,磨刀機用來開刀鋒和磨缺口的確不錯,但由于磨刀的角度和時間不易掌握,故效果并不理想。根據我們的經驗,真正的鋒刃很難用機器磨出來。一次性刀片在很大程度上解決了這個問題。如用一次性刀片,必須及時更換刀口。一個刀口切小標本不應超過20~25只蠟塊,切大標本不應超過10~15只蠟塊。

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