當前位置:上海酶聯生物研究所>>技術文章>>今日解說:關于ELISA 酶結合物的制備方法
※ ELISA 酶結合物免疫酶技能又稱酶免疫測定法,是繼免疫熒光技能和放射免疫技能后發展起來的又一種免疫符號技能。
※ 它是把抗原抗體的特異性反響和酶的高效催化作用相結合而樹立的。該技能通過化學辦法將酶與抗體或抗抗體結合,構成酶符號物,這些酶符號物仍保持免疫學活性和酶的活性。
※ 然后將它與相應的抗體或抗原起反響,構成酶符號復合物,結合在免疫復合物上的酶,在遇到相應的底物時,則催化底物產生水解、氧化或還原等反響,而生成可溶性或不溶性有色物質。
※ 然后依據顯色的深淺來反映待測樣品中抗原或抗體的含量,如生成的有色物質為可溶性,則可用肉眼比色或酶標測定儀測定光密度值(OD)定性或定量。
※ 如生成的有色物質為不溶性沉淀物,一起又是電子致密物質,則可用光學顯微鏡或電子顯微鏡辨認和定位。因而,免疫酶技能是一項定位、定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg水平)的歸納技能。
ELISA 酶結合物注意以下原因:
① 裝備對照品溶液的容器或溶劑被污染。
② 盛放活動相的容器或裝備溶劑被污染。
③ 進樣器被污染。
④ 高效液相進樣閥被污染。
⑤ 色譜柱填充物出現開裂等。
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