ELISA試劑盒DAB顯色時刻過長或濃度過高，顯色時刻不超越5-12分鐘會導致染色過強，孵育的溫度一般在室溫20-28度，抗體濃度過高或孵育時刻過長都會下降抗體滴度，操作中增加試劑時緩沖液未瀝干應該每步滴加試劑前瀝干切片中剩余的緩沖液，這樣可以防止染色變弱，試劑超越有用使用時刻應替換試劑，每步沖刷3次每次5分鐘。
 
選擇ELISA試劑盒應盡量選擇正規廠家，產品經相應部門審閱認可，試劑應從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面點評。
靈敏度：有二層意義，
1. 為試劑檢出被檢物質的低量的才能
2. 為試劑對很多樣品中陽性檢出的才能
特異性：常用穿插反響率表明。含有與待測物附近結構部份的物質可能存在穿插反響，使測定成果升高，可能導致假陽性，所以穿插反響是點評其質量的要害目標。
精密度：ELISA試劑盒一般指其批內CV%，其值應小于15%；定量試劑應一起調查線性規模。
準確度：經過增加回收實驗進行點評。
簡便性：指在不影響試劑的前三項目標的前題下，實驗和測定過程越少越好，在定性實驗中成果判斷簡單明了，定量實驗成果核算也應簡單。
安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
經濟性：試劑在平等質量條件下經過大規模出產或技術進步下降成本，而市場價格比較合理。
試劑點評：需求有威望的確證辦法和確證的樣品進行檢測。