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應用親和素和*的ELISA試劑盒,親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個*分子親密結合。現在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。*又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物,*-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成*醫學教育網整理化的產物。親和素與*的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由于1個親和素分子有4個*分子的結合位置,可以連接更多的*化的分子,形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和*與ELISA試劑盒偶聯起來,就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。
親和素-*系統在ELISA試劑盒中的應用有多種形式,可用于間接包被,亦可用于終反應放大。可以在固相上先預包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與*結合,通過親和素-*反應而使*化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結合點充分暴露。另外,在常規ELISA試劑盒中的酶標抗體也可用*化的抗體替代,然后連接親和素-酶結合物,以放大反應信號。
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