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液相色譜柱使用的3個注意事項

閱讀:2085發布時間:2018-8-27

  液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
   經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的,使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復雜。直到20世紀60年代.發展出粒度小于10μm的固定相,并使用了高壓*和自動記錄的檢測器,克服了經典液相色譜的缺點,發展成液相色譜,也稱為高壓液相色譜。

1.色譜柱的安裝
色譜柱在使用過程中避免強烈的碰撞和震動。各個廠家生產的色譜柱在接口尺寸上有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細管接頭兩者類型不匹配,將會產生漏液或者死體積過大的現象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內留有空隙而產生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。


2.色譜柱的平衡
色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運行幾遍測試,等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時,應該先使用水過渡后,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發生,從而損壞色譜柱。


3.色譜柱的保存
hao遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實際應用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下,建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。純有機相保持有大限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會將已水解而暫時吸附在柱內的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進程加快,縮短壽命;另外,純有機相保存時,溶劑易揮發,導致柱床變干,也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應保持在所用流動相中。


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