elisa試劑盒的制備流程一:

    酶標抗體 （酶標抗體制備技術基本要求是將酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合，此種結合既不改變抗體的免疫反應活性，也不影響酶的生物化學活性。用于標記抗體的酶較多，常用的有辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化物酶和β-半乳糖苷酶等。） 或抗抗體（抗免疫球蛋白）結合物可采用戊二醛法或過碘酸鹽氧化法制備。郭春祥建立的辣根過氧化物酶（HRP）標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。現將操作方法介紹如下： 

（一） 結合物的標記將5mg HRP溶于05ml蒸餾水中，加入新配制的006mol/L NaIO4水溶液05ml，混勻，置冰箱30min，取出加入016mol/L乙醇水溶液05ml，室溫放置30min后，加入含5mg純化抗體的水溶液（或PBS）1ml，混勻并裝透析袋，以005mol/L、pH值95碳酸鹽緩沖液緩慢攪拌透析6h使之結合，然后吸出加NaBH4溶液（5mg/ml）02ml，置冰箱2h。

（二） 將上述結合物混合液加入等體積飽和硫酸銨，冰箱放置30min，離心，將所得沉淀物溶于少許002mol/L、pH值74 PBS中，并對之透析。次日再離心除去不溶物，即得酶抗體結合物。用002mol/L、pH值74 PBS加至5ml，進行測定后，冷凍干燥或低溫保存。

（三） 結合物稀釋度的測定
ELISA試劑盒用酶結合物中抗體相應的抗原直接包被聚苯乙烯反應板，采用ELISA直接法測定酶結合物效價。通常本法制備的酶結合物作1∶10 000稀釋時，其OD403仍在01以上。 

elisa試劑盒的制備流程二：

    ELISA試劑盒 結合物中辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）與抗體量的測定酶標結合物于751型分光光度計上分別用280及403nm波長測定其光密度（OD），并計算出OD403與OD280之比值以及HRP與抗體的mol/L比。
結合物中HRP濃度（mg/ml）=OD403×04 
結合物中IgG濃度（mg/ml）=（OD280-OD403×03）×062 
酶/抗體mol/L比=HRP濃度IgG濃度×4
ELISA試劑盒因此，免疫酶技術是一項定位、定性和定量（敏感度可達每毫升ng~pg水平）的綜合技術。常用的酶是辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）和堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）。