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閱讀:219發布時間:2017-7-5
ELISA試劑盒抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分顯露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以選用直接的捕獲包被法,的特異抗體作預包被,這以后通過抗原抗體反應使抗原固相化。也可用親和素*系統作直接包被,即用親和素先包被載體,然后參與*化的DNA,這種包被方法均勻、健壯,ELISA試劑盒已拓展應用于各種抗原物質的定量測定。
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性有些互相吸附,并堅持其免疫學活性;
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶聯接構成酶聯絡物,而此種酶聯絡物仍能堅持其免疫學和酶學活性。
(3)酶聯絡物與相應抗原或抗體聯絡后,可根據參與底物的顏色反應來判定是不是有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度閃現試驗效果。
ELISA試劑盒含雜質較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯絡的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果于。ELISA試劑盒可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以添加其吸附功用。例如,在查看抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而遍及的固相載體一般不能直接與核酸聯絡。換言之,包被就是抗原或抗體聯絡到固相載體表面的進程。
ELISA試劑盒是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所致使的流行癥、寄生蟲病及非流行癥等方面的免疫診斷
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