硝酸還原酶NR測試盒NADH速率法_氮代謝系列
測定方法：分光光度法
產品規格：50管/48樣
注 意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
硝酸還原酶NR測試盒NADH速率法_氮代謝系列
測定意義：
NR（ EC 1.7.1.3）廣泛存在于植物中，是植物硝態氮轉化為氨態氮的關鍵酶，也是誘導酶，對作物的產量和品質有影響。
測定原理：
NR 催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；NADH 在 340 nm 有大吸收峰，通過測定 NADH 減少速率來表示 NR 活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
誘導劑儲備液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 20mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加 4mL 提取液溶解，現配現用。
誘導劑應用液的配制：用時將誘導劑儲備液稀釋 10 倍，即取 10mL 誘導劑儲備液加 90mL
蒸餾水，充分混勻。
動植物組織樣品的前處理：
（1）取適量誘導劑于燒杯中，將新鮮標本洗凈，濾紙吸干，放入誘導劑應用液中（淹沒即可），浸泡 2h，取出樣本，濾紙吸干。
（2）按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
注意：
1、 建議使用新鮮沒有冷凍過的樣本。
2、 一般不要誘導處理，預測定結果沒有活性（ΔA≤0）則需要誘導處理。
細菌或培養細胞的前處理：
先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
環保在線