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探討脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染大鼠L6骨骼肌成肌細(xì)胞的zui適轉(zhuǎn)染條件,同時(shí)觀察綠色熒光蛋白作為報(bào)告基因用于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化的可行性.方法以綠色熒光蛋白為報(bào)告基因,通過改變質(zhì)粒DNA、脂質(zhì)體與質(zhì)粒的比例及轉(zhuǎn)染時(shí)間,在熒光顯微鏡下觀察并計(jì)算轉(zhuǎn)染效率.
結(jié)果在20 mm培養(yǎng)皿中,1μDNA與1μl脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染大鼠L6骨骼肌成肌細(xì)胞6 h,轉(zhuǎn)染效率zui高.
結(jié)論建立了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染大鼠L6骨骼肌成肌細(xì)胞的優(yōu)化轉(zhuǎn)染方法;綠色熒光蛋白可作為報(bào)告基因優(yōu)化脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染條件.
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