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上海紀寧實業有限公司

酶聯免疫試劑盒中的HRP和OPD是什么?

時間:2019-10-12閱讀:7000
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   在買到酶聯免疫試劑盒的時候大家都會看到HRP盒OPD這兩個英文,那你知道這兩個英文在酶聯免疫試劑盒中是什么嗎?上海豐壽來告訴你。

 

   酶聯免疫診斷試劑盒(上海豐壽的試劑盒)的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用于顯色。另外,常用的底物還有:1)AP的底物,常用的為對-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應物為的對硝基酚,測讀波長為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對硝基藍四氮唑,反應產物為不溶性的藍色沉淀什么是TMB?TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應。

 

  且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發色團。同時反應產物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應進行。

 

  TMB的反應產物為深藍色,利于光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的范圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。

 

  由于上述優點,目前TMB常用于光鏡及超微結構水平的HRP及HRP-WGA神經投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應在2h內新鮮配制。另外,TMB是一種較強的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作。

 

  TMB經HRP作用后共產物顯藍色,目視對比鮮明。TMB性質較穩定,可配成溶液試劑,只需與H2O2溶液混和即成應用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無致癌性等優點,因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止后,TMB產物由藍色呈,可在比色計中定量,適吸收波長為405nm。

 

  ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所采用。

 

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