當前位置:上海紀寧實業有限公司>>技術文章>>ELISA試劑盒的應注意關鍵要素
在ELISA系統的要害要素中,包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關系到你做出的抗體可不能夠被其辨認,所以保留抗原很重要,ELISA試劑盒我做重組蛋白時,必定要在冰浴下緩慢消融就是這個道理。就是讓很多不相關的蛋白質充填這些曠地空閑,然后排擠ELISA后的步驟中干擾物質的再吸附。但有時因為實驗的需求,包被原的特殊性也可能選用中性的緩沖溶液來包。
試劑盒選用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)。該法適于測定細胞培養上清、血清、血漿及組織液中的樣本,干擾小能夠測到每毫升納克水平的細胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體;
②酶符號的抗原或抗體;
③酶作用的底物。
試劑盒廣泛用作非放射性同位素的成鍵化驗。在這種方法中,通常規范配體是固定的,通過參與溶液相受體或蛋白質來使之成鍵。通過參與與受體特異性反響的抗體來定量成鍵的受體,并且*初抗體的量以參與第二種能顯色的抗體測量。第二種抗體能辨認抗體的結束,在其結束的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發作反響,然后使溶液顯色。
操作留意:
(1)試劑盒保存在2-8℃,運用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再運用。
(2)實驗中不必的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
(3)嚴格依照闡明書中標明的時刻、加液量及次第進行溫育操作。
(4)一切液體組分運用前充沛搖勻。
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