1． 內源性物質
ELISA試劑盒普遍認為大概40%的大鼠血清標本中富含非特異性攪擾物質，能夠不相同程度影響檢查成果。多見的攪擾物質有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig （s）抗體、穿插反響物質和其它物質等。
（1）類風濕因子
血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）能夠與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接，然后致使假陽性。處理該狀況的方法是：①用F（ab）2代替完好的IgG；②標本用聯有熱變性（63℃，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG參加到標本稀釋液中相同有用）；③檢查抗原時，能夠用2-巰基乙醇等參加到標本稀釋液中，使RF降解。
（2）補體
ELISA體系中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發作變構，其FC段的補體C1q分子位點被露出出來，使C1q 能夠將二者連接起來，然后構成假陽性。處理的方法是：①用EDTA稀釋標本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加熱血清使C1q滅活。
（3）嗜異性抗體
血清中富含能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig （s） 的天然嗜異性抗體，可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來，也能構成假陽性。處理的方法是：可在標本稀釋液中參加過量的動物Ig （s） ，但參加量不足或亞類不相同時無效。
（4）嗜靶抗原的本身抗體
抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體，有時能與靶抗原構成復合物，在ELISA方法中均可攪擾抗原抗體測定成果。為防止以上狀況呈現，處理的方法是：測定前需用理化方法將其解離后再測定。
（5）醫源性誘導的抗鼠Ig （s） 抗體
臨床開展的用鼠源性CD3等單克隆抗體醫治，用放射性同位素符號鼠源性抗體的印象確診及靶向醫治等新技術，均有也許使這些患者體內發生抗鼠抗體；別的，被鼠等嚙齒類動物咬傷的患者體內也能夠發生抗鼠Ig （s） 抗體。這些患者ELISA測守時均可發生假陽性。處理的方法是：測定抗原時，在標本中參加充足的正常鼠Ig （s） ，然后戰勝因為上述要素構成的假陽性。
（6）穿插反響物質
類、類AFP樣物質等，是與靶抗原有穿插反響的物質。在用多抗測定抗原時對測定成果影響不大，但在用單克隆抗體測定抗原時，假如穿插抗原決定簇正好是所用單克隆抗體相對應的靶決定簇時，也會呈現假陽性成果。
（7）標本中其它成分的影響 血清脂質過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA測定成果有攪擾效果。
2． 外源性物質
ELISA試劑盒外源性物質常常是因為用于ELISA測定的血標本的收集、儲存不妥等要素所形成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚不全和采血管中增加物等影響。
（1）標本溶血 
因為各種人為要素致使的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA測定中，會致使非特異性顯色，攪擾測定成果。為戰勝上述攪擾效果，標本收集時有必要注意防止溶血。
（2）標本受細菌污染 
因菌體中也許富含內源性辣根過氧化物酶，因而，被細菌污染的標本同溶血標本相同，亦可發生非特異性顯色而攪擾測定成果。
（3）標本保留不妥
在冰箱中保留過久的標本，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可構成二聚體，在間接法ELISA測定中會致使本底過深、乃至構成假陽性；標本放置時刻過長（如一天以上），有時抗原或抗體免疫活性削弱，亦可呈現假陰性。為戰勝上述攪擾，ELISA測定的血清標本宜為新鮮收集；如不能當即測定，5天內測定的血清標本可存放于4℃，1周后測定的血清標本應低溫凍存；凍存后融解的標本，蛋白質有些濃縮，散布不均，應充沛混合后再測定，但混勻時應輕柔，不可激烈振動。
（4）標本凝聚不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液收集后1/2~2h開端凝結，18~24h*凝結。臨床查驗工作中，有時為了爭取時刻迅速檢查，常在血液還未開端凝結時即強行離心別離血清，此刻的血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測定過程中能夠構成肉眼可見的纖維蛋白塊，易構成假陽性成果；這類狀況于次日復查時因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復查成果變為陰性。為防止上述攪擾效果，處理的方法是血液標本收集后有必要使其充沛凝結后再別離血清，或標本收集時用帶別離膠的采血管或于采血管中參加恰當的促凝劑。
（5）標本管中增加物質的影響
ELISA試劑盒抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過氧化物酶活性）及迅速別離血清的別離膠等均對ELISA測定有必定攪擾效果。
經過以上的剖析和總結，臨床查驗ELISA測定中呈現假陽性或假陰性等錯誤的成果，掃除大鼠ELISA試劑盒要素和操作要素，再有就是從標本要素進行剖析，并應采納相應措施掃除攪擾，然后保證檢查成果的準確性