目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響，用于ELISA試劑盒測定的臨床標本zui為常用的是血清（漿），有時由于特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集，要留意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。再如治療藥物的檢測，應根據藥代動力學選擇服藥后的zui適時間抽血檢測。又如當從臥位變為站立位時，血清中腎素活性將泛起顯著增高。如可的松在早晨4～6點之間，會有一峰值泛起：生長激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發性方式開釋，因此，在測定此類激素時，有必要在緊密親密相連的時間距離內采取數份血樣本，以其中間值為測定值。只是在處理和保存方面要考慮以下幾個方面：
一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清
    融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體 效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑（見3.2.4）。
    按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾 水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
    在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。
    加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。ELISA試劑盒每次加標本應更換吸嘴，以發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀的血清，可在試管 中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。