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當(dāng)前位置:上海紀寧實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒并給出相應(yīng)的解決辦法
臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、ELISA試劑盒花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
下面分析ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,
1. 選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣
可能原因: ① 血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣; ② 手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); ③ 加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法: ① 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,ELISA試劑盒用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 ② 加樣后及時放入孵箱。 ③ 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。④ 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA試劑盒標(biāo)準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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