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江蘇科特商貿有限公司

江蘇科特為您推薦確定毒性水平和消除培養污染的實驗步驟

時間:2015-8-27閱讀:328
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1.

在無抗生素的培養基中消化、計數和稀釋細胞,稀釋到常規細胞傳代的濃度。

2.

分散細胞懸液到多孔培養板中,或幾個小培養瓶中。在一個濃度梯度范圍內,把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,兩性霉素B推薦下列濃度,0.250.501.02.04.0,8.0 mg/ml

3.

每天觀測細胞毒性指標,如脫落,出現空泡,匯合度下降和變圓。

4.

確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度23倍濃度的抗生素的培養液培養細胞23代。

5.

在無抗生素的培養基中培養細胞一代。

6.

重復步驟4

7.

在無抗生素的培養基中培養46代,確定污染是否以已被消除。

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