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促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟

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促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟【成份】

藥盒組成及配制 50 100 200

1.[125I]-LH() 1 1 2

2.LH校準(zhǔn)品 1 1 1

LH校準(zhǔn)品(7/)濃度分別為:(0、5、10、25、50100、200)mIU/mL

3.LH抗體() 1 1 2

4.質(zhì)量控制樣品 1 1 1

5.分離試劑 1 1 2

6.藥盒使用說明書 1 1 1

促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟操作方法

1.樣品采集:取血,分離血清,備用。(28)℃放置可保存2周;若冰凍保存,可放置五周。脂血或溶血樣品影響測定結(jié)果。

2.實驗方法:試管編號,按下表程序操作。

操作表 單位:μL

管別

校準(zhǔn)品

樣品

蒸餾水

抗體

125I-LH

混勻,室溫放置(1216)小時。

分離劑

T

--

--

--

--

100

--

NSB

200(S0)

--

100

--

100

500

S0

100

--

--

100

100

500

S1管~S

100

--

--

100

100

500

血樣品管

--

100

--

100

100

500

混勻,室溫放置15分鐘,離心(3500轉(zhuǎn)/)15分鐘,吸棄上清液,在放免儀上測定各管沉淀的放射性計數(shù)(cpm)。

數(shù)據(jù)處理

1.計算機(jī)處理:建議采用“對數(shù)計量-相對結(jié)合率的分?jǐn)?shù)對數(shù)”〔log(dose)logit(Bi/B0)〕數(shù)學(xué)模型或四參數(shù)數(shù)學(xué)模型擬合。

2.計算、繪圖法:

計算各管的百分結(jié)合率:以S0(cpm數(shù))B0,各校準(zhǔn)管Si(cpm數(shù))Bi,求各管的百分結(jié)合率。

 

.線性回歸:用logXlogitY回歸,求出r、a、b值,樣品含量可由下式計算得出。

 

.繪圖法:用各校準(zhǔn)點計算的結(jié)果,在loglogit坐標(biāo)紙上繪制校準(zhǔn)曲線圖,被測樣品的含量可根據(jù)Bi/B0的百分結(jié)合率從校準(zhǔn)曲線圖上查出。

正常參考值

各實驗室應(yīng)根據(jù)實驗?zāi)P?/span>建立自己的動物參考。

技術(shù)特性

1.靈敏度:<0.3mIU/mL

2.測定范圍:(5200)mIU/mL

3.精密性:批內(nèi)變異系數(shù)CVw10%,批間變異系數(shù)CVb15%。

參考文獻(xiàn)

1.Bremnerw J:PituifaryPonadotropinsans their dosorders,Principles of endocinodosy and metabolism KL 1990,pp152-6.

2.Wu CH:Monitoring of oradation induction Fertilsteril 30:617,1978.

【性狀】

液體組份應(yīng)澄清,無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】

放射性核素碘[125I]半衰期(T1/2)=60

促黃體生成激素放免試劑盒操作步驟【適應(yīng)癥】

測定原理

本藥盒是利用放射免疫分析方法進(jìn)行測定的。在均相競爭抑制反應(yīng)中采用平衡法,對血清樣品中LH的含量進(jìn)行直接測定。測定中校準(zhǔn)品、樣品等中的LH125I-LH競爭*的LH抗體結(jié)合位。當(dāng)被測樣品中LH的含量高時,剩余的抗體結(jié)合位就少,從而與抗體結(jié)合的125I-LH就少,反之亦然。利用分離試劑分離出抗原-抗體復(fù)合物,并測定復(fù)合物中的放射性計數(shù)。125I-LH的結(jié)合量與樣品中LH的含量呈函數(shù)關(guān)系,通過數(shù)據(jù)處理可求出樣品中LH的含量。

臨床意義

促黃體生長激素(LH)是由垂體前葉分泌的糖蛋白激素,其分子量大約為30000,由兩條多肽鏈(即α和β亞單位)組成。LHα亞單位與FSHLH和HCG的亞單位的結(jié)構(gòu)相似。β亞單位在上述激素之間是不同的,從而賦予各激素各自的生物及免疫學(xué)特性。在雌性體中,LH在卵泡期限與FSH一起促進(jìn)卵泡的成熟、雌性激素的合成和分泌;促進(jìn)排卵和使排卵后的卵泡轉(zhuǎn)變?yōu)辄S體;促進(jìn)間質(zhì)的生長;并促進(jìn)黃體合成和孕激素與雌性激素的分泌。雄性LH促進(jìn)睪丸間質(zhì)細(xì)胞增生,促進(jìn)其合成和分泌睪丸酮。由于LHFSH的作用是互相協(xié)同的故二者常同時測定。LH增高見于Klinefelter綜合癥、Turner綜合癥、性腺切除后及促性腺激素產(chǎn)生腫瘤;減低見于西蒙氏病、席漢氏綜合癥、肥胖性生殖器退化綜合癥、垂體性侏儒、睪丸腫瘤、卵巢腫瘤、神經(jīng)性厭食及使用雌激素后。

 

【注意事項】

1.所有試劑包括待測樣品實驗前應(yīng)事先在室溫下平衡20分鐘,且使用前應(yīng)充分搖勻。

2.不同批試劑不能混合使用,每份樣品都應(yīng)做雙管實驗。

3.本實驗使用放射性核素碘[125I](劑量為0.2μCi/mL),故應(yīng)注意放射防護(hù)。放射性廢物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。

齊一生物以上資料供參考,如有疑問歡迎

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