羥自由基測試盒說明書 一、實驗儀器： 
試管、微量移液器、旋渦混勻器、37°C 恒溫水浴鍋，可見分光光度計（550nm） 
二、適用范圍： 
血清（漿）、各種組織勻漿液、中性白細胞、某些藥物、部分植物、培養細胞、培養上清液等。 
三、測定意義： 
        羥自由基（·OH）是一種氧化能力很強的自由基，其性質很活潑，氧化各種有機物和無機物
的速率極快，是造成組織脂質過氧化、核酸斷裂、蛋白質和多糖分解的主要因素，與機體衰老、
腫瘤、輻射孫損傷和細胞吞噬能力有關。 
四、操作步驟： 
  標準空白管  標準管  對照管  測定管 
蒸餾水（ml）  0.4  0.2  0.2   
0.03％H2O2標準應用液（ml）    0.2     
底物應用液（ml）      0.2  0.2 
樣本*（ml）        0.2 
試劑三應用液（ml）  0.4  0.4  0.4  0.4 
混勻，37℃反應１分鐘（準確以秒表計時），從加完試劑三開始到一分鐘結束，立即加
入顯色劑終止反應，一次只能做一只管子。 
顯色劑（ml）  ２  2  2  ２ 
混勻，室溫放置 20 分鐘后，１cm 光徑， 550nm，蒸餾水調零，測各管吸光度值。 
五、計算公式： 
1、血清計算公式： 
1
(/ ) (8 824 / )
ml
Uml mmol L
?
=×× ×
?
抑制羥自由基 樣本測試前 標準品濃度 對照OD值 測定OD值
標準OD值 空白OD值 取樣量 能力 稀釋倍數 ．  
2、組織計算公式: 
(/ ) (8 824 / ) g Umgprot ml mmol L
? ? ?
=×÷ × ? ?
? ? ?
抑制羥自由基 取樣量 標準品濃度 待測樣本蛋白濃度 對照OD值 測定OD值
標準OD值 空白OD值 能力 () ． （ prot/L）
 
3、溶血液計算公式： 
( )
1
8 824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
標準品濃度 抑制羥自由基 樣本測試前 對照 值 測定 值
． 標準 值 標準空白 值 取樣量 能力 的稀釋倍數 ×  
4、產生羥自由基能力的計算公式： 
( )
1
8824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
標準品濃度 樣本測試前 產生羥自由基 測定 值 對照 值
． 標準 值 標準空白 值 取樣量 的稀釋倍數 能力 ×