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大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒

時間:2014-7-4閱讀:509
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大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)酶聯免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
250pg/ml - 8000pg/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中N 端前腦鈉素(NT-proBNP)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠N 端前腦鈉素(NT-proBNP)水平。大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒用純化的
大鼠N 端前腦鈉素(NT-proBNP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次
加入N 端前腦鈉素(NT-proBNP),再與HRP 標記的N 端前腦鈉素(NT-proBNP)抗體結合,形
成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化
下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N 端前腦鈉素
(NT-proBNP)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算
樣品中大鼠N 端前腦鈉素(NT-proBNP)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
2 酶標試劑6ml×1 瓶8 標準品(16000 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒酶標包被板12 孔×8 條9 標準品稀釋液1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
8000 pg/ml 5 號標準品150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
4000 pg/ml 4 號標準品150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2000 pg/ml 3 號標準品150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
1000 pg/ml 2 號標準品150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
500 pg/ml 1 號標準品150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。
操作程序總結:
計算
3
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒有效期:6 個月

Anti-Defensin β1  防御素β1抗體
anti-DEK oncogene (DNA binding)  DEK癌基因結合蛋白
Anti-Defensin β2  防御素β2抗體
Anti-Deltex-1  DTX1 (Deltex protein 1)
Anti-Dengue Virus(Dengue virus type -2)  抗登革熱病毒抗體
Anti-Des antibody (Desmin)  結蛋白(抗體)
Anti-DFF-45/ICAD (DNA fragmentation factor-45)  DNA裂解因子抗體
Anti-Digoxin IgG (兔抗Dig-RCA)  兔抗抗體
Anti-DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT)  DISC1 C端抗體
Anti-DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT)  DISC1 N端抗體
anti-DJ-1  絲裂原依賴性癌基因蛋白抗體
Anti-DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformα/β)  兔抗DLX4抗體
Anti-DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1)  抑癌基因抗體
Anti-Dnmt1(DNA methyltransferase 1)  DNA甲基轉移酶1抗體
Anti-Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A)  DNA甲基轉移酶-3α抗體
Anti-Dnmt3β (DNA (cytosine-5)-methyltransferase 3 β)  DNA甲基轉移酶-3β抗體
Anti-DPPA2 (developmental pluripotency associated gene2)  多能發育相關基因2抗體
Anti-DR3/TNF-αR/TRAMP (death receptor 3)  TNF-α膜受體抗體/DR3 死亡受體3抗體
Anti-DR4/APO2/TRAILR1 (Death receptor 4)  死亡受體4抗體
Anti-DTNBP1 (Dysbindin-1)  精神分裂癥易感基因抗體
Anti-DVL1 (dishevelled 1)  蓬亂蛋白1抗體
Anti-Dynamin 2(Mouse Anti-Human Dynamin-2 Monoclonal Antibody)  鼠抗人鳥苷三磷酸酶-發動蛋白2單克隆抗體
Anti-Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 )  兔抗人鳥苷三磷酸酶-發動蛋白2抗體
Anti-Dysbindin/rhogap92b  精神分裂癥易感基因抗體
Anti-E2F1  轉錄因子E2F-1抗體
Anti-E2F2  轉錄因子E2F-2抗體
Anti-E7 protein (Human papillomavirus type 16)  人乳頭瘤病毒16型E7抗體
Anti-EAAT1/Glast(Excitatory amino acid transporters 1)  膠質細胞谷氨酸運載蛋白1 抗體
Anti-EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear antigens 3)  EB病毒編碼核蛋白-3抗體
Anti-ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1)  內皮素轉化酶1ECE1抗體
Anti-ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)  食道癌相關基因抗體
Anti-ECM1 (extracellular matrix protein 1)  細胞外基質蛋白1抗體
Anti-ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1)  外胚層發育不良抗體
Anti-EGF-R (Epidemal growth factor receptor)  表皮生長因子受體抗體
Anti-EGFR-ⅤⅢ  表皮生長因子受體-8抗體
Anti-Egr-1 (Early growth response 1)  早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗體
Anti-Emp1 (epithelial membrane protein 1)  表皮膜蛋白1抗體
anti-EMAb(Endometrium)  抗子宮內膜抗體
Anti-Endostatin  內皮抑素/內皮他丁抗體
Anti-EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule)  上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗體
Anti-EPEC-IgG O (Anti-Enteropathogenic E.coli )  大腸埃希桿菌O抗體
Anti-EphA2 R(Ephrin A2 Receptor)  酪氨酸蛋白激酶受體A2抗體
Anti-EphB2 R (Ephrin B2 Receptor)  酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體
Anti-ER  雌激素受體

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