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脂肪干細胞的培養方法

閱讀：1539發布時間：2017-6-1

脂肪干細胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）是近年來從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。研究發現ADSCs細胞能夠在體外穩定增殖且衰亡率低，同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞，適宜大規模培養，對機體損傷小等優點，而且其來源廣泛，體內儲備量大，適宜自體移植，逐漸成為近年來新的研究熱點之一。

培養方法：

將脂肪組織沖凈，稱重后消化。當消化完成后，棄掉上層未消化的脂肪組織，將下層的細胞懸液以1500 r/min（375g），離心10 min 后棄上清，得到離心管底部的脂肪干細胞團，將其重懸，密度調整到1×105mL-1，然后接種在培養面積為25 cm2 的細胞培養瓶中。

當干細胞長滿培養瓶后按一傳二進行傳代，具體的傳代方法是：首先，用D-Hanks 沖洗一遍細胞，然后加入2 mL 的混合酶溶液（0.25%*和0.02%EDTA）消化，當在顯微鏡下觀察到細胞發生明顯的變形，縮成球狀后，立即用含有10%胎牛血清的培養基中止消化，并用吸管輕輕吹打瓶底部，確保細胞*脫落分離到懸液中，再把細胞懸液置于離心機上，以1000 r/min （167g），離心5 min。zui后，將離心得到的細胞團重懸，調整密度為合適密度進行接種。

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