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上海哈靈生物科技有限公司
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ELISA實驗的注意事項以及技術指南
2013-8-21 閱讀(791)
ELISA實驗的注意事項！
1.認真并且仔細的閱讀相關說明書
2.確保elisakit試劑盒沒有過期。
3.根據說明書把需要的試劑事先配置好。
4.樣品制備必須標準化，根據2-3％的金額重復的井制備的樣品的體積比（存儲），嘗試做一個備份等分。短期內無法實驗者，注意低溫保存。
準備所有必要的實驗其他項目如試管，槍頭，移液器，離心機等。
根據檢測到的數量的試樣，以確定所需的試劑量。
7.根據說明書將所用試劑與室溫平衡，配置好需要使用的試劑。
ELISA常見技術指南
1.選擇時選擇一種單克隆抗體和多克隆抗體配對;如果選擇兩個單克隆抗體，必須承認不同的抗原決定簇，從同一家公司選擇的抗體對。
2.ELISA法檢測時為了確定*的信號和zui低的背景應與對方捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預實驗命題滴定。在同一時間應包括在適當范圍內的標準品稀釋系列。提供的試劑由傳統的手工操作的范圍。
3.標準品的配制：對于每一個細胞因子應仔細閱讀說明書注意每個批次的細節。在使用細胞因子前應該瞬時離心試劑瓶，盡可能多收回其中的細胞因子。
4.正常情況等測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做八次二倍系列稀釋從2000pg/毫升到15pg/毫升。可借助標準的ELISA使用流程、第三類試劑、放大試劑盒、或改變酶底物系統可在一定范圍內促使提高靈敏度。
5.因為要優化靈敏度，建議標準和樣品孵育過夜。
6.如果您正在使用過氧化物酶作為一種顏色系統，應禁止在洗滌和稀釋劑加入*，*抑制過氧化物酶的活性。
