產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類(lèi)或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱(chēng)：Human BMP-7 Protein
產(chǎn)品中文名稱(chēng)：重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7（BMP-7）
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號(hào)：EY-01X8779
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):
序列:氨基酸序列來(lái)源于：人源 BMP7(Met315-His431) (P18075) 表達(dá)的蛋白片段。
活性:Testing in Progress
蛋白長(zhǎng)度：重組人BMP7由117個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為13.2 KD。
純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)
通過(guò)LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。
產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的20 mM Tris-HCl，250 mM NaCl，pH 8.0。
基因ID:655
使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉動(dòng)?動(dòng)
背景
Bone morphogenetic protein 7 (BMP-7) is a multifunctional ligand protein belongs to the TGF-β family. BMP-7 is involved in regulating the proliferation, invasion, and migration of cancer cells, and is associated with various human tumors. BMP-7 binds to ALK2 or ACVR2A/BMPR2 excitation signals, which are regulated and terminated by SMADs. BMP-7 is involved in the BMP-7 Smad1/5/9 signaling pathway and is associated with the epithelial mesenchymal transition (EMT) process. BMP-7 also eliminates vascular inflammation, maintains vascular integrity, weakens vascular calcification, and stimulates in situ phosphorylation deposition. The growth factor domain of human BMP-7 shares 98% aa sequence identity with mouse and rat BMP-7.
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性?xún)?nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMP檢測(cè)試劑盒鴨環(huán)0酸腺苷(cAMP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒(針對(duì)一甲基)10/20次
MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠檢測(cè)試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠試劑盒、小鼠檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽檢測(cè)試劑盒 小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽試劑盒、小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽檢測(cè)試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠動(dòng)?動(dòng)
大鼠熱休克蛋白40(HSP40)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： HSP40 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3)檢測(cè)試劑盒
RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 大鼠0脂酶A2(PL-A2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGSTpi(HumanglathioneS-ansferases0ELISAKit人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因
細(xì)胞超氧化物陰離子比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7（BMP-7）IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
