性能指標
- 分辨率為140,000(m/z=200);
- 高質量準確度(外標<3ppm,內標<1ppm);
- 梯度流速:20-2,000 nL/min;
- 高分辨質譜采集速率:12Hz。
主要應用
- 蛋白質定性分析:蛋白質序列分析,肽指紋圖譜分析、蛋白質從頭測序;IP或者Pull down樣品定性分析等
- 相對定量蛋白質組學研究:血液、組織、細胞以及細菌等樣品的非標(DDA/DIA)和標記(iTRAQ/TMT)定量蛋白質組學分析。
- 翻譯后修飾(PTM)蛋白質組學研究:磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化等修飾位點的鑒定。
樣品要求
- 分析測試中心對于外來樣品嚴格把控,對于、精神類藥品的測試都有部門的及嚴格的測試程序。
- 樣品提供者承諾對樣品的合法性負責,未注明合法性和物理化學性質的樣品不予測試。 疫情期,校外客戶請選擇以下送樣方式,否則快遞員無法進校,樣品可能不知所蹤。
- 待測樣品不得使用氯仿、苯、乙酸乙酯、DMSO等作為溶劑;不得含有機或無機強酸強堿; 粉末樣品需提供樣品重量;粉末樣品內不能有可見鹽顆粒。溶液樣品需要注明樣品濃度、溶劑及是否含有其它成分(高濃度鹽類、表面活性劑、強酸、強堿)。
- 若樣品中含有鹽分或者其它雜質,需預除鹽或除雜后再送樣或者選擇除鹽或者除雜測試; 單一蛋白至少提供5-10pmol的樣品量; 混合蛋白樣品至少提供5-10ug的樣品量; 蛋白樣品是考馬斯亮藍染色或者銀染切膠回收的蛋白質膠條,膠條需保存在超純水,并且放置4度冰箱,放置時間不超過七天;已經做過前處理的蛋白樣品前處理過程要詳細描述; 樣品制備操作過程中要用進口無蛋白槍頭和離心管;樣品制備操作過程勿帶普通乳膠手套, 可用PE手套或者無粉的乳膠手套.
儀器說明
- Easy-nLC 1000系統具有在超高壓條件下分離生物分子(比如蛋白質和多肽)的*性能。
- 可與質譜系統無縫連接以直接執行安全可靠的檢測。更高的操作壓力范圍(0-1000bar)顯著縮短了分析周期,其設計旨在通過加速上樣和柱重新平衡的過程提高分析效率。另外,即使面臨非常復雜的樣品,新系統的不分流納升級功能也能提供出色的保留時間重復性(RSD小于0.4%)。
- Q Exactive組合型四極桿 Orbitrap 質譜儀具有HRAM 和全掃描能力可以自始至終捕獲所有樣品數據,從而實現回顧性數據分析而無需再次掃描樣品;分辨率高達 140,000 FWHM,可消除同量異序同分異構化合物的干擾,在分析復雜基質中的樣品時,提高結果可靠性;全掃描和全離子碎片(AIF)模式質量準確度均優于1ppm,可以確保可靠的化合物識別;快速極性切換可以獲得最多信息;AIF 和多重解離技術——源內 CID 和 HCD——可以輔助化合物識別;擴展的質量數范圍達到 6,000m/z,可以提高對單電荷小分子和生物分子的檢測能力;超過四個數量級的掃描動態范圍以及飛克級靈敏度,可以在一次掃描中同時檢測痕量級和高豐度化合物