本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
總抗氧化能力（DPPH法）測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6437 |
商品介紹：
測定意義: 測定對象中各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學、醫學和藥學研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液，細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。 測定原理： DPPH為穩定的自由基 ，溶于甲醇、乙醇等極性溶劑中，在515nm處有最大吸收。向 DPPH溶液中加入抗氧化劑時，會發生脫色反應，因此可用吸光度的變化并以Trolox作為對照體系量化抗氧化物質的抗氧化能力。 自備實驗用品： 恒溫水浴鍋、低溫離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
10uL AP標記的抗抗體 Anti Biotin Ab,AP 4℃保存
2 ug pK18mobSacB pK18mobSacB 低溫運輸，-20℃保存
解磷細菌培養基（有機磷細菌培養基） Phosphate-solubilizing bacteria medium 250g
1瓶 M5076細胞株 M5076 低溫運輸和保存
接觸皿培養基 contacts medium 250g
1瓶 HCT-116細胞株 HCT-116 低溫運輸和保存
100mL TB Solution-IV TB Solution-IV 常溫保存
2次 包涵體大量純化試劑盒 Inclusion Body Maxiprep Kit 常溫保存（需要-20℃保存）
2 ug pSUOER-retro-puro pSUOER-retro-puro 低溫運輸，-20℃保存
100mL 水飽和 Water-Saturated Phenol 常溫避光保存
2 ug pCMV-Tag 5B pCMV-Tag 5B 低溫運輸，-20℃保存
總抗氧化能力（DPPH法）測試盒微量法TMEM161A 跨膜蛋白161A抗體 規格: 0.2mlG protein beta 4/GNB4 G蛋白β4抗體/核苷酸結合蛋白β亞基4 規格: 0.2ml
ACTH (1-39) 促上皮質激素(1-39)抗體 0.1mlAngiomotin 管抑素結合蛋白抗體 0.2ml
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1抗體(Integrin α3β1) 規格: 0.2mlGoat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗兔IgG 規格: 0.3ml
MC3 Receptor 黑素皮質素受體3抗體 規格: 0.2mlnNos/NOS-1 氮合成-1抗體（神經型） 規格: 0.1ml
TCHP 抑蛋白TCHP抗體 規格: 0.2mlRenalase 胺抗體 規格: 0.2ml
envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃包膜糖蛋白抗體 規格: 0.2mlphospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524) 磷酸化磷脂酰肌醇激催化亞單位D抗體 規格: 0.1ml
HAS3 透明質酸合成3抗體 規格: 0.2mlIL-7 白介素7抗體 規格: 0.1ml
PARD6B 缺陷性分配同源物β抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗雞IgM 規格: 0.1ml
MVD 甲羥戊酸脫羧抗體 規格: 0.1mlSnake poison Protein 蛇毒蛋白抗體（中華眼鏡蛇） 規格: 0.2ml
ARRDC4 抑制蛋白結構域蛋白4抗體 規格: 0.2mlADK/AK 苷酸激抗體 0.1ml
Uricase 尿酸 規格: 0.1mlCD2 CD2抗體 規格: 0.1ml
CD63/MLA1 黑色素瘤相關抗原抗體 規格: 0.1mlMCM5 微小染色體維持缺陷蛋白5抗體 規格: 0.1ml
