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國產(chǎn)ELISA試劑盒競賽法

時間:2017-12-1閱讀:572
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國產(chǎn)ELISA試劑盒競賽法檢查抗原
當(dāng)小分子抗原或半抗原因缺少可作夾心法的兩個以上的抗體位點,因而不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,能夠選用競賽法形式。辦法的基本原理可見圖2,經(jīng)洗刷后分成兩組:一組加酶符號抗原和被測抗原的混合液,而另一組只加酶符號抗原,再經(jīng)孵育洗刷后加底物顯色,這兩組底物降解量之差,即為所要測定的不知道抗原的量。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
競賽法的扼要操作過程:
)先參加抗體,使抗體固定于載體外表;
2)參加梯度濃度比例的待測樣品與酶標(biāo)抗原混合物,一同做只加酶標(biāo)抗原的對照組;
3)參加酶促反響底物,發(fā)作顯色反響,比照實驗組及對照組的顯色區(qū)別,計算不知道抗原的量。
雙抗原夾心法檢查抗體
雙抗原夾心法的反響形式與雙抗體夾心法相似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶物,以檢查相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不一樣之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測定,因而其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢查常選用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原構(gòu)造的不一樣,尋覓適宜的符號辦法。
雙抗原夾心法的扼要操作過程為:
)先參加抗原,使抗體固定于載體外表;
2)再加樣品,使目標(biāo)檢查抗體構(gòu)成抗原-抗體復(fù)合物;
3)加酶標(biāo)抗原;
4)參加酶促反響底物,發(fā)作顯色反響,顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
間接法檢查抗體
間接法是檢查抗體常用的辦法。其原理為使用酶符號的抗抗體(辣根過氧化物酶符號的兔抗抗體)以檢查與固相抗原的受檢抗體(),故稱為間接法。本法主要用于對病原體抗體的檢查而進(jìn)行流行癥的確診。間接法的長處是只需改換包被抗原就可使用同一酶標(biāo)抗抗體樹立檢查相應(yīng)抗體的辦法。
國產(chǎn)ELISA試劑盒間接法的扼要操作過程:
)將特異性抗原與固相載體聯(lián)合,構(gòu)成固相抗原;
2)加稀釋的受檢血清,保溫反響。血清中的特異抗體與固相抗原,構(gòu)成固相抗原抗-體復(fù)合物;3)加酶標(biāo)抗抗體;
4)參加酶促反響底物,發(fā)作顯色反響,顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
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國產(chǎn)ELISA試劑盒

 

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