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南京森貝伽生物科技有限公司

怎樣評估ES細胞合格的胎牛血清?

時間:2013-10-29閱讀:775
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    使用 D3 ES細胞。這是一個對于胎牛血清中生長促進、生長抑制和分化因子非常敏感的細胞系。如何評估呢?我們通過以下幾個方面來具體分析

相關生長效率分析:

     當 ES細胞以非常低的密度傳入包含10%胎牛血清的生長培養基中,檢測開始和支持ES細胞克隆的能力。 

    細胞毒分析:

     當以非常低的密度傳入包含 30%胎牛血清的生長培養基中,檢測 ES細胞和 feeder 細胞的生長能力。

    相關形態學和分化分析:

    檢測胎牛血清支持未分化 ES 細胞克隆的能力。通過堿性磷酸酶活性評估分化程度。未分化的 ES 細胞小顏色深紅粉紅,分化的細胞較大,豐滿, 顏色較淺。

    所有的分析在沒有 ESGRO 的情況下進行的,培養基中出現 ESGRO 會掩蓋由胎牛血清所導致的問題。(ESGRO 或 LIF 經常用來保持 ES 細胞處于 未分化狀態。)

    經過培養發現,大約 8 批中有 1 批可以用來培養 ES 細胞。

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